银杏叶的药理作用龚旭龄郑明祺 龚旭肌肉

药理作用

银杏含黄酮甙类和内酯类具有降低血清胆固醇、防止动脉粥样硬化、增加冠状动脉血流量、改善中枢神经功能、解除平滑肌痉挛、消炎、抗过敏、抗休克、消除氧自由基等，而白果内酯尚有抗原虫作用。现分述如下〔39～126〕。

1．对心血管系统作用

（1）扩血管作用：黄酮类化合物对在位豚鼠后肢和离体大鼠后肢血管灌注实验，均见血管扩张作用〔41〕。有增加家兔颈动脉和耳动脉的血流量〔42〕。在一项60例随机双盲临床药理研究中，以银杏叶提取物EGb-761(含黄酮甙24%，萜类6%)200mg溶于生理盐水中进行静脉输注，每日1次，连续4日，可致皮肤血流量增加，血液粘度下降〔73〕。另在10例随机单盲交叉试验中，口服银杏叶提取物kaveri(含黄酮甙25%，萜类6%)112.5mg,可使甲褶毛细血管血流量增加及红细胞凝集度降低，而血细胞压积、血浆粘度以及其它血液学指标无改变〔73〕。

（2）对缺血心脏的保护作用：银杏提取物EGb-761灌流离体大鼠和豚鼠心脏，对缺血后再灌注有良好保护作用。对整体大鼠的缺血心脏，EGb-761可减少心律紊乱和心电图异常〔43〕。大鼠结扎冠状动脉前降支90分钟，再灌注180分钟，或阻断冠状动脉前降支90分钟，再灌注48小时后，观察心肌梗塞区面积，银杏内酯B能显著缩小梗死区〔44〕。EGb-761能抑制乳酸脱氢酶外漏，降低维生素C含量，却使脱氢维C增加，提示其保护作用与抗氧化机制有关。

（3）对心血管的作用机制：银杏叶提取物对心血管保护作用机制较为复杂，主要是黄酮甙和内酯类共同作用的结果。①内皮衍生松驰因子。银杏提取物（2～4mg/ml）对苯肾上腺素引起的兔主动脉收缩有松驰作用；如事先剥去动脉内皮，则能部分消除银杏叶提取物的松驰作用，提示银杏叶扩血管作用至少有部分通过血管内皮细胞释放内皮衍生松驰因子（DERF，或即NO）所引起〔45〕。②阻断动脉肾上腺素а受体。银杏叶乙醇提取物“舒血宁”0.2ml(含总黄酮甙0.8mg)，可对抗去甲肾上腺素引起的家兔离体主动脉条收缩反应，提示有阻断а受体的作用。舒血宁主要抑制去甲肾上腺素引起的慢时相收缩，而对其快时相收缩无明显影响。说明对血管平滑肌细胞内钙离子的释放有抑制作用〔46，47〕。③激动静脉肾上腺素а受体。银杏叶提取物能引起离体兔腔静脉收缩，且呈剂量依赖性，其半效量（ED₅₀）为86μg/ml。肾上腺素а受体阻断剂酚苄胺（phenoxybenza-mine）1×10^-7mol/L可完全阻断去甲肾上腺素引起的腔静脉收缩，能减弱银杏叶提取物收缩腔静脉作用50%〔46〕。提示银杏叶提取物既通过阻断动脉а受体，减轻心脏前负荷，可增加心血输出量；又通过激动静脉а受体，提高静脉回心血量，亦可增加心输出量。进一步支持银杏叶治疗心脏病的证据〔48〕。④抑制血管紧张素转换酶。银杏叶总黄酮对正常人血清中血管紧张素转换酶有抑制作用，水提物抑制率达62.5%,醇提物抑制率更高达82.5%。认为银杏总黄酮抑制小动脉收缩、降低外周血管阻力，改善血流灌注组织细胞，可能尚与抑制血管紧张素转换酶有关〔49〕。⑤抑制血小板活化因子。银杏内酯类对血小板活化因子有特异性抑制作用（详后），后者在病理状态下大量释放，能显著抑制心血管功能〔50〕。银杏内酯可阻断此病理过程〔51〕。

（4）对正常心血管功能的影响：银杏黄酮甙类的治疗剂量，对大鼠、豚鼠、兔、猫等的正常心血管功能如血压、心率、呼吸均无明显影响〔40，41〕；而用治疗量的100～1000倍时，才对正常豚鼠引起中等度血压降低、心率减慢、呼吸加快〔41〕，此可证明黄酮甙类毒性很小。银杏叶中尚含血小板活化因子拮抗剂银杏内酯B等萜类化合物。银杏内酯B对生理性低浓度的血小板活化因子作用很弱，而对病理性高浓度血小板活化因子则有很强拮抗作用〔52〕。因此银杏内酯类对正常生理功能无影响，而对多种病理情况：包括心脏缺氧缺血、过敏性疾患、感染性休克等却有显著的治疗作用〔50〕。银杏叶制剂的安全范围很大，可能是本品的优点和特点〔51〕。

2．对中枢神经系统的作用

（1）对脑循环的作用：银杏叶100%水煎剂经乙醇沉淀后的上清液，据麻醉猫、狗实验，能明显降低脑血管阻力，增加脑血流量；且在增加脑血流量的同时，亦增加冠脉血流量，并不增加心肌耗氧量。银杏叶注射液与罂粟碱比较，其扩张血管的作用相似，而罂粟碱能显著加快心率，从而增加心肌耗氧量，会加重心脏负担。因此银杏叶治疗脑血管疾病较罂粟碱优越〔53〕。

清醒大鼠实验，用¹⁴C标志的碘化安替匹林（¹⁴C-Iodoantipyrin）测定局部脑血流量，结果表明银杏提取物130mg/kg静脉注射后，在中枢神经系统绝大多数部位的血流量均有明显增加，与对照组相比，皆有统计学意义〔54〕。

家兔大脑表面应用其自身血清引起小动脉痉挛性收缩，随后用银杏叶提取物（EGb-761）2～25mg/kg静脉注射，拮抗脑小动脉的挛缩程度与持续时间均有明显效果，且存在剂量依赖性关系〔55〕。

啮齿类动物南非沙鼠（gerbilusiateronia）的右总颈动脉结扎，造成同侧大脑缺血，其特征为缺血侧大脑半球中线粒体呼吸指数降低，细胞内K+丧失和Na+积储，卒中指数（strokeindex）上升。所有这些脑缺血指标，均可由于动物在缺血前7天，每天腹腔注射银杏叶提取物（EGb-761）10mg/kg,或每天口服60mg/kg而得到减轻。其效果优于腹腔注射血管扩张剂长春胺（vincamine）10mg/kg；或口服肾上腺素能а-受体阻滞剂麦角溴烟酯（nicergoline）10mg/kg的效果〔56〕。

大鼠氯化三乙基锡（triethyltinchloride）亚急性中毒的脑水肿病理模型，银杏叶提取物在大鼠停止给毒物后3天开始治疗1～4周。形态学观察银杏叶提取物能显著减轻脑水肿，第一周治疗后即见明显好转；治疗组动物的星形神经胶质细胞内辅酶I（NADH）-和辅酶Ⅱ（NADPH）-四唑蓝还原酶（tetrazoliumreductase）的活性，均比对照组高。星形细胞突起也恢复正常〔57〕。

（2）保护血脑屏障：大鼠注射血管紧张素Ⅱ引起急性高血压，或者内颈动脉注入微球造成微血管阻塞性脑缺血，均可破坏血脑屏障，并使¹²⁵Ⅰ标记的血管紧张素Ⅱ（八肽）能透过损坏的血脑屏障，测定¹²⁵Ⅰ放射性强度即可反映血脑屏障的损坏程度。EGb-761口服，每日50或100mg/kg,预先连续服用1周，可明显降低血脑屏障的损害程度〔58〕。

（3）改善记忆功能：小鼠用亚硝酸钠生成高铁血红蛋白造成中枢缺氧，或用M-胆碱受体阻滞剂东莨菪碱，均可抑制动物记忆功能。银杏叶水提取物和醇提取物均能明显改善小鼠记忆功能。醇提取物的效果较水提取物更强。银杏叶提取物也能促进正常小鼠的记忆功能〔59〕；老龄大鼠（26月龄）的阳性条件反射的学习记忆实验，银杏叶提取物的促智效果与人参提取物相似；而合用两种提取物，则有协同促智作用〔60〕。中老年妇女经Sternberg氏记忆力测试法，服用大剂量银杏叶提取物（EGb-761600mg）后1小时，测试短期记忆能力，有明显改善〔148〕。

大鼠阳性迷津试验，正确路线终点为灯光，安全取食；错误路线终点遭到电击。试验白果内酯（bilobalide），经口给药5～20mg/kg,可提高阳性迷津成功率，除能改善记忆功能外，尚有抗紧张和抗焦虑的作用〔61〕。

（4）对脑外伤的影响：成年大鼠预先每天腹腔注射银杏叶提取物100mg/kg,连续30天，仅见总活动量减少，对迷津灯光的敏感性降低，无明显毒性；仅在用药13天后出现对伤害性（疼痛）刺激的反应性降低。30天后大鼠接受两侧额叶的损伤手术，再继续给药30天，并每日测试上述反应，结果治疗组反应率与假手术组相近，而与盐水治疗的手术组不同，说明银杏叶有较好疗效。最后各组进行病理解剖和组织学检验，亦表明用药组脑组织的病变较轻〔62〕。

大鼠一侧大脑皮层运动区损伤的偏瘫病理模型，每天饮用EGb-761加糖精溶液含药100mg/kg,连续7天或30天，结果亦表明用药组比仅饮糖精的偏瘫组恢复更快、更完全〔63〕。但银杏叶对于感觉缺损的测试无明显改善；而且对于采用外源性中枢抑制性神经递质r-氨基丁酸经渗透微泵局部灌注大脑运动区的大鼠，当停止灌注后出现反跳性惊厥症状（癫痫病理模型）也没有治疗作用〔63〕。

（5）对第八对脑神经切断引起的前庭综合征的影响：实验用清醒豚鼠，切断一侧第八对脑神经后，出现的代偿性前庭神经损害综合征（compensatoryvestibularsyndrome）,表现为可逆性固定姿势症状。银杏提取物EGb-761能改善这种综合征，其作用部位为直接兴奋第四脑室底部的前庭神经核的神经细胞〔64〕。前庭神经系统联系广泛，其功能涉及躯体平衡、眼球动作、肌张力、体位和脊髓反射，以及植物神经系统等方面。前庭障碍时可出现眩晕、眼球震颤、恶心呕吐等症候。

（6）对神经递质的影响：

①去甲肾上腺素大鼠每日口服银杏叶提取物后可引起大脑皮层中去甲肾上腺素的氧位甲基转移酶代谢产物甲基去甲肾上腺素含量发生双相变化，在服药后45分钟开始减少，然后，在14天后显著增加，此可反映去甲肾上腺素的含量变化。继续每天给药至1个月，以³H-双氢心得舒（dihydroalprenolol）结合率测定的肾上腺素能ß受体显著减少（下调）；给药2个月，以异丙肾上腺素激动ß受体引起的腺苷酸环化酶活性也降低。银杏叶长期给药引起大脑去甲肾上腺素释放增加、ß受体减少以及腺苷酸环化酶活性降低，Brunello等认为与银杏叶治疗脑血管疾病有关〔65〕。Racgni等〔66〕比较成年大鼠与老年大鼠银杏叶制剂对大脑肾上腺素能ß受体的影响，结果对成年大鼠ß受体无明显影响，但能特异性激动老年大鼠大脑皮层的ß受体，并认为与银杏叶制剂治疗老年性大脑综合征（cere-bralaging syndromes）有关。

对磷酸二酯酶的影响：正常大鼠脑组织的环磷腺苷磷酸二酯酶（3′5′-cyclic AMPphosphodiesterase）体外实验证明，低浓度银杏叶提取物（0.25～4.0mg/L）可提高磷酸二酯酶活性；而高浓度（5～250mg/L）则抑制之，且有剂量依赖性。对于用氯化三乙基锡慢性中毒脑水肿的大鼠，低浓度银杏叶提取物可部分恢复对环磷腺苷高亲和力（0.25μmol/L）磷酸二酯酶活性；但对环磷腺苷低亲和力（50μmol/L）的磷酸二酯酶则呈抑制性影响。整体动物实验，给氯化三乙基锡中毒的大鼠，银杏叶提取物大剂量连服7日，可加速脑水肿的恢复，同时，并能使被氯化三乙基锡抑制的磷酸二酯酶活性恢复正常；如预防性给于银杏叶提取物尚能防止氯化三乙基锡引起的脑水肿和磷酸二酯酶活性降低〔67〕。

②5-羟色胺银杏叶提取物EGb-761较低浓度（4，16μg/ml）能显著增加小鼠大脑皮层匀浆制备的突触体（synaptosomes）对³H标记的5-羟色胺的摄取（但不增加³H-多巴胺的摄取）。三环类抗抑郁药氯丙咪嗪（cholmipramine）为选择性抑制5-羟色胺摄取药物，其1×10^-6mol/L浓度可阻滞EGb-761促进5-羟色胺摄取的作用。

小鼠预先给于EGb-761一次口服100mg/kg,2小时或14小时后取大脑皮层制备突触体，或者每天口服两次，每次100mg/kg,连续4天后制备的大脑皮层突触体，也能显著增加5-羟色胺的摄取量。但EGb-761也不增加小鼠纹状体制备的突触体对³H标志的多巴胺的摄取〔68～70〕。

至于银杏提取物中哪些成分对5-羟色胺的摄取有促进作用，Ramassamy等〔70〕进行了下列实验：银杏内酯类混合物（BN52063）不增加5-羟色胺摄取，银杏叶总黄酮类（CP202）可增加5-羟色胺摄取。由于银杏叶黄酮类成分复杂，究竟那种黄酮能促进大脑皮层摄取5-羟色胺尚有待进一步研究。但黄酮类中的槲皮素（quercetin），并不增加突触体摄取5-羟色胺。目前，口服银杏叶提取物（EGb-761）可以被吸收达到上述作用。

此外，银杏叶提取物EGb-761尚能逆转老年大鼠大脑皮层5-羟色胺受体亚型5-HT_1A受体数量的减少。用5-HT_1A受体配基8-羟基-2-（二-n-丙胺）-四氢萘（8-hydroxy-2(di-n-propylamino)tetralin）(³H标记)进行结合试验，测定大鼠大脑皮层神经细胞膜5-HT_1A受体数量，结果表明：老年大鼠（24月龄）比年青大鼠（4月龄）的5-HT_1A受体减少22%；而长期口服EGb-761后老年大鼠5-HT_1A受体增加33%，而不改变年青大鼠该受体的数量。说明银杏叶治疗老年性大脑综合征有保护神经细胞膜的作用。已知5-HT_1A受体对激动剂（5-羟色胺）很敏感，具有抑制性功能，对高等动物的正常睡眠有重要生理作用〔71〕。银杏叶对老年人睡眠障碍有效，可能与此有密切关系。

③毒蕈碱型乙酰胆碱受体（M受体）用配基结合试验测定大脑M受体数量，老年大鼠比青年大鼠有显著减少。口服银杏叶提取物EGb-761，每日100mg/kg,连服4周，可使老年大鼠大脑皮层M-胆碱系统受体数量显著增多〔73〕。中枢胆碱系统与意识和记忆等功能有密切关系〔72〕。银杏叶对老年性智力减退当有良好效益。

用M-胆碱受体阻滞剂东莨菪碱（scopolamine）1～5mg/kg腹腔注射，能显著破坏动物的学习和记忆功能。银杏叶提取物、piracetam、双氢麦角克碱（dihydroergocristine）和萝芙巴新（raubasine）合用；结果这四种药物都能改善东莨菪碱引起的记忆障碍病理模型，提高记忆能力。提示银杏叶制剂至少和现有所谓益智药物（cognitiveenhancers）有相似疗效。提示可用于治疗大脑功能不全、老年性精神衰退、老年性记忆力障碍等〔72〕。

近40年来大量研究证明中枢胆碱能系统是意识、记忆的重要基础，近年来还发现中枢肾上腺素能和5-羟色胺能系统与意识、记忆也有关系〔74〕。老年性大脑综合征除中枢胆碱能系统出现退行性变化外，去甲肾上腺素能和5-羟色胺能神经系统也有衰退。而银杏叶制剂尤其是黄酮甙类对上述三神经系统的功能都有良好防治的效果，较长时间服药，能提高这些系统的功能，增强记忆能力〔65～72〕。虽然早老性痴呆患者基底前脑等部位胆碱能标志的改变与痴呆的严重性相平行，但单独应用拟胆碱药物如毒扁豆碱治疗，效果有限。张中启和罗质璞实验发现〔75〕：有促进小鼠迷宫学习记忆能力的拟胆碱药吲哚满酯（胆碱酯酶抑制剂）和单用无效剂量的а受体拮抗剂苯戊唑合用后，能促进和改善迷宫记忆的获得、再现，以及被动回避的获得。银杏叶制剂具有增加乙酰胆碱含量和减少去甲肾上腺含量的双重作用。银杏叶制剂单用与吲哚满酯和苯戊唑合用的效应相似，比单用拟胆碱药或а受体拮抗药有更好疗效〔65，72〕。中枢去甲肾上腺素系统的完整性虽然不影响年轻动物对学习和记忆的行为模式的操作，但会影响记忆的长期保持〔74，75〕。中枢去甲肾上腺素受体以ß受体占优势，而银杏叶制剂对老年动物中枢ß受体有特异性激动作用〔76〕，提示本品对老年人的近期学习记忆难以长期保持问题，可能有较好防治效果。

中枢5-羟色胺能神经系统不但与睡眠有关，而且参与胆碱能神经系统完成学习记忆功能。大鼠注射5-羟色胺能神经元毒剂（如5，6或5，7-二羟色胺能损毁中枢5-羟色胺能神经元），会加重因胆碱能隔区-海马通路损伤引起的学习记忆障碍〔74，76〕。而老年动物和人大脑5-羟色胺和乙酰胆碱含量减少，学习记忆功能减退。银杏叶制剂长期给药能使这两种神经递质增加，因而能改善学习记忆功能〔68～72〕。

④阻滞兴奋性氨基酸受体银杏叶6-羟基犬尿烯酸有拮抗N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体作用。对中枢缺氧、缺血、中风、癫癎等引起兴奋性氨基酸过度释放而产生神经元损害有一定保护作用〔76〕。

（7）中枢催醒作用：小鼠注射环己巴比妥钠、氯醛糖、乌拉坦等中枢抑制药引起的睡眠时间，可被银杏萜内酯显著缩短，证明银杏内酯和白果内酯皆有中枢催醒作用〔77〕。

（8）对脑电图的影响：在两项临床双盲试验中分析脑电图中а波（每秒钟8～13次）和θ波（每秒4～7次）。а波常在清醒或安静并闭目时出现；而θ波常在困倦时出现。老年性大脑功能不全患者的脑电图显示θ/а波的比率上升。应用银杏叶两种制剂（EGb-761和LI-1370,所含黄酮甙类依次为24%和25%；所含萜类皆为6%）治疗，皆使θ/а波比率较安慰组明显下降，θ波相对减少，恢复正常水平。表明银杏叶制剂有改善脑代谢和脑功能的作用〔44〕。

3．拮抗血小板活化因子作用从银杏叶中分离到银杏内酯A、B、C、J和由银杏树根分离到银杏内酯M，皆有拮抗血小板活化因子（platelet-activatingfactor, PAF）的作用。此作用在银杏叶提取物的药理作用中占有重要地位，受到国内外医药界重视。

血小板活化因子主要由巨噬细胞、多形核白细胞、嗜酸性粒细胞、血小板、血管内皮细胞等产生。其生理的新生途径（de novopathway）合成量很少，而病理的修饰途径（remodelingpathway）则可大量生成〔78，79〕。病理刺激物激活磷脂酶A₂，水解浆膜磷脂中磷脂酰胆碱（卵磷脂），生成溶血磷脂酰胆碱，再经乙酰化生成血小板活化因子，化学名1-O-烷基-2-乙酰-3-溶血磷脂酰胆碱。其中烷基为C₁₈H₃₅或C₁₈H₃₇。

磷脂酰胆碱被磷脂酶A₂水解的另一产物为花生四烯酸（二十碳四烯酸），再经环氧酶途径生成前列腺素（PGs）和血栓烷A₂（TXA₂）；或经脂氧酶途径生成白三烯类（LTs）。并与血小板活化因子（PAF）共同组成脂类介质（lipidmediators），介导各种炎症过程和变态反应。

PAF受体存在于血小板、巨噬细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、某些淋巴细胞、血管、肺、肝、肾、脑、眼等细胞膜表面。血小板活化因子激活PAF受体后，可引起蛋白激酶C激活，促进生成三磷酸肌醇（IP₃）、二酰基甘油（DG）等第二信使，从而发生靶细胞反应〔78～80〕：如血小板聚集，白细胞聚集、释放介质和过氧化物，微血管通透性增加而使血液浓缩，外周血管扩张而使血压下降，肺血管收缩而使肺动脉高压，脑血管收缩而使脑血流量减少，心肌抑制、心律失常，支气管平滑肌收缩、粘液分泌增多，胃肠平滑肌收缩和粘膜损伤等病理反应。所有这些反应几乎都可被银杏内酯类，尤其是特异性很高的银杏内酯B所阻滞〔81～88〕。大量动物实验结果可以提供银杏内酯的广泛应用前景。并可考虑与影响其他脂类介质（前列腺素和白三烯）的药物联合应用。

银杏内酯类包括银杏内酯A、B、C、J、M等，皆为20碳六环内酯化合物，化学结构和药理作用大同小异〔79，92〕。

（1）阻滞PAF受体作用：①玻器内试验。应用³H-PAF与兔血小板特异性受体结合试验，测得银杏内酯半数抑制浓度（IC₅₀）：A为9.4×10^-5,B为2.5×10^-7,C为1.7×10^-5mol/L〔91〕；或A为9.7×10^-6,B为3.6×10^-6,C为3.8×10^-5mol/L〔92〕。应用抑制PAF诱导人、兔血小板聚集反应实验，银杏内酯B的IC₅₀分别为7.5×10^-9和2.5×10^-9mol/L〔80〕。游松等〔93〕分离的银杏内酯B、C抑制兔血小板聚集IC₅₀依次为1.9×10^-7和3.9×10^-7。上述试验结果皆以银杏内酯B最强。②体内外联合试验。兔口服银杏内酯B15mg/kg（人1mg/kg）后分离其血小板，对PAF的反应性明显降低；并能抑制电刺激大鼠颈总动脉引起的血栓形成〔91〕。说明口服银杏内酯B有抑制血小板聚集反应及动脉血栓形成。

（2）抗变态反应：豚鼠经注射卵清蛋白致敏后，隔一定时间再次注射卵清蛋白，可引起肺变态反应，出现重度支气管收缩，并伴有周围血液中血小板和白细胞减少症。若在再次注射抗原前5分钟静脉注射银杏内酯B1～2mg/kg,几乎能完全抑制豚鼠支气管的收缩反应；银杏内酯B剂量减少到0.1mg/kg仍能大部分抑制支气管的收缩反应，并能部分减轻外周血液中血小板和白细胞耗损，说明支气管哮喘发病机制中血小板活化因子的重要作用〔94〕。给多种动物静脉注射或喷雾给予血小板活化因子，引起支气管平滑肌收缩的强度比组织胺强20000倍，比白三烯D₄强600倍，这使血小板活化因子成为迄今发现的一种最强大的支气管收缩剂。而银杏内酯B阻滞PAF受体，既抑制血小板的聚集和释放介质，也能阻滞肺泡巨噬细胞活化、嗜酸性粒细胞在呼吸道浸润，并抑制支气管平滑肌痉挛性收缩以及减少微血管渗出。

银杏内酯B对过敏性休克也有防治效果，可抑制血浆渗出，减轻血液浓缩，提高血压；抑制呼吸系统和消化系统的平滑肌收缩，并能显著提高实验动物存活率〔95〕。

（3）抗内毒素血症：败血症或感染性休克患者，或革兰阴性杆菌内毒素（脂多糖）静脉注射造成内毒素血症的实验动物，均可使血中血小板活化因子水平升高数倍。杜文华等报道〔96〕家兔静脉注射大肠杆菌内毒素（200mg/kg）后5分钟，血浆中血小板活化因子（PAF）即显著上升，同时平均动脉压即明显下降，心肌收缩力亦明显受到抑制，8小时生存率降到47%。如事先注射银杏内酯B（5mg/kg,ip），以阻滞PAF受体，实验动物内毒素血症的多种情况明显好转，生存率升至73%。注射内毒素后8小时主要情况参见表1。

表1 银杏内酯B对内毒素血症的疗效

Bahr等报道〔97〕大鼠内毒素休克病理模型，银杏内酯B能显著减少前列腺素E₂（有扩张血管、降低血压作用）；和血栓烷（有促进血小板聚集、收缩微动脉、减少组织血流灌注等作用），并使内毒素休克大鼠血压回升，且显著提高生存率。

豚鼠吸入含有内毒素的气溶胶后，可出现肺内血小板聚集、肺泡血管通透性增加、肺水肿等。银杏内酯B（BN 52021）和总银杏内酯混合物（BN 52 063）预先给药，均能防止上述病理反应〔98〕。

家兔内毒素血症时，尚可出现明显的肝细胞变性、坏死；门静脉压高压；肝细胞三磷酸腺苷（ATP）含量降低；脂质过氧化产物丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量升高；ALT、AST、乳酸脱氢酶（LDH）等升高，肝功能恶化。所有这些肝脏形态和功能的病理变化，均可被银杏内酯B（5mg/kg,ip）显著阻止，参见表2〔96〕。

（4）对急性胰腺炎的实验治疗：大鼠急性胰腺炎病理模型采用牛磺胆酸钠按0.5mg/kg注入胰管，腹腔注射银杏内酯B5mg/kg治疗，与造型对照组相比，6小时后血清淀粉酶由26042IU/L降至21186IU/L（下降19%）；胰组织超氧歧化酶由2.44升至2.83NU/mg蛋白（升高16%），丙二醛由170降至120nmol/g蛋白（降低29%），Ca²⁺下降40%；大鼠24小时死亡率由100%降至40%。上述急性胰腺炎指标皆有显著效果；胰腺病理组织学变化也有显著减轻〔99〕。与Aig等〔100〕报道的结果基本一致。但比Leonhardt等〔101〕应用雨蛙肽引发大鼠急性胰腺炎，采用另一种PAF受体拮抗剂WEB-2170（三唑苯二氮草类化合物）的效果更好。

表2 银杏内酯B对内毒素肝损伤的保护作用

（5）抑制移植物排斥反应：银杏叶提取物与环孢菌素（cyclosporine）联合应用能显著延长家兔皮肤移植物的生存时间；比传统应用的免疫抑制剂联合治疗方案：如唑硫嘌呤为基础，加甲基强地松龙，或加抗胸腺球蛋白，或加环孢菌素的效果都好；而与甲基强地松龙加环孢菌素的效果相似。因此，应用血小板活化因子拮抗剂银杏内酯类与免疫抑制剂合用，较两种免疫抑制剂合用的效果好，实验结果表明血小板活化因子可能参与细胞免疫介导的移植物排斥反应〔102〕。甲基强地松龙通过抑制磷脂酶A₂，使膜磷脂（磷脂酰胆碱）不被水解，可阻断脂类介质包括血小板活化因子的生成。

4．清除氧自由基作用氧自由基包括超氧阴离子（O^—·₂）羟自由基（·OH），单线态氧（¹O₂），过氧化氢（H₂O₂）。有杀菌、调节免疫等作用。但在病理情况下产生过量的氧自由基可引起许多生物大分子如蛋白质、核酸、以及膜不饱和脂肪酸等超氧化反应，导致细胞损害。许多病理生理现象如衰老、肿瘤、突变、炎症、变态反应、器官缺血再灌注损伤等都与氧自由基有关。银杏叶既含有超氧化物歧化酶（SOD），能清除氧自由基；又含有黄酮类化合物，可直接清除氧自由基；又含有萜类银杏内酯，可间接通过阻滞嗜中性粒细胞PAF受体减少氧自由基生成。因此，银杏叶制剂在清除自由基的中药中占有重要地位〔1～9，79〕。

（1）超氧化物歧化酶（SOD）：银杏叶中含有一种含铁原子的、对氰化物不敏感的超氧化物歧化酶（superoxidedismutase）,含2个大小相同的亚单位，分子量47000Da。每克分子量酶中含1.4g铁原子。此酶存在于银杏叶的叶绿质小体的基质中〔103，104〕。因为酶是蛋白质，口服可被消化液分解，故口服无效。唯可加于皮肤用药和美容保健品，以清除氧自由基。

（2）黄酮类：银杏叶中山柰酚、槲皮素、芸香甙、橙皮甙、银杏双黄酮、异银杏双黄酮、杨梅黄酮（myricetin）、花色素甙（anthocyanin）等均有抗氧自由基、抑制脂质过氧化、保护生物膜（细胞膜和细胞器膜）的作用〔6，114～116〕。黄酮化学结构中具有3、3’、4位三羟基化合物有抗氧化作用。Morel等〔105〕在玻器内观察肝细胞，用Fe³⁺和氮三醋酸（nitrilotriaceticacid）诱导脂质过氧化，表明黄酮类抗氧化作用与其螯合Fe³⁺有关。

（3）银杏内酯类：包括银杏内酯A、B、C等。本类化合物并无直接清除氧自由基作用，但可通过阻滞血小板活化因子引起巨噬细胞和粒细胞的呼吸爆发途径产生的超氧自由基〔109〕。

（4）银杏叶提取物：西欧从银杏叶提取物相当于生药的1/50的EGb-761,含银杏黄酮甙24%、萜类6%。在几种体外试验中皆有抗自由基作用，在捕捉羟基和二苯苦味酰肼基（diphenylpicrylhydrazylradical）方面的活性，与已知的自由基清除剂尿酸的效力相当〔108〕。人嗜中性粒细胞实验，当加入可溶性激活剂如细菌内毒素（脂多糖）、酵母多糖等可激活其髓过氧化酶（myeloperoxidase），引起呼吸爆发，白细胞耗氧量陡然增加，产生大量O^-.₂和H₂O₂。银杏叶提取物在500μg/ml、250μg/ml、125μg/ml，均可显著减少O^-.₂和H₂O₂的生成；对H₂O₂生成的减少更为显著，低至15.6μg/ml即有较明显抑制作用〔109〕。

（5）银杏叶制剂对个别器官的抗氧自由基作用：①保护中枢神经的作用。大鼠脑神经元可储留2’，7’-二氯萤光素，并被细胞内H₂O₂氧化而发出强萤光。在神经元培养液中加入杨梅黄酮、槲皮素或银杏叶提取物，均能抑制脑神经元产生过氧化氢而减弱萤光。杨梅黄酮作用最强，最低有效浓度仅为3nmol/L；槲皮素次之，为10nmol/L〔106〕。②保护神经突触体摄取递质功能。纹状体神经元制备的突触体（synaptosomes）可摄取³H-多巴胺，大脑皮层制备的突触体可摄取³H-5羟色胺。当培养液中加入维生素C（5×10^-6mol/L）和Fe²⁺后，突触体的摄取递质功能，可被进行性降低，到1小时后几乎失去摄取递质功能。而Fe²⁺螯合剂去铁胺（desferrioxamine）可保护摄取功能，表明有氧自由基产生而抑制突触体摄取功能。银杏叶提取物（EGb-761）4～16μg/ml有浓度依赖性防止突触体丧失摄取递质功能。但银杏内酯混合物（BN52063）浓度增加到0.5μg/ml（相当于EGb-7619.2μg/ml所含银杏内酯A、B、C量），不能防止丧失摄取功能。相反，银杏总黄酮1μg/ml或槲皮素0.1μg/ml则均有保护作用〔110〕。此外，纹状体制备的神经元突触体膜的流动性，可用1，6-二苯-1，3，5-已三烯萤光法测定。当有维生素C（0.1mmol/L）和Fe²⁺(1μmol/L)存在时，突触体膜的流动性明显降低；去铁胺（0.1mmol/L）、EGb-761(2～16μg/ml)、槲皮素（0.1μmol/L）以及维生素E同类物TroloxC(0.1mmol/L)皆有保护作用。表明银杏叶黄酮类有清除氧自由基、保护神经细胞作用〔111〕。③对脑水肿保护作用。用Bromoethalin(1mg/kg)引起大鼠脑脂质过氧化和脑水肿的病理模型，给银杏叶浸膏100mg/kg灌胃，测定脂质过氧化产物丙二醛，以及脑组织水、Na⁺含量，并观察中枢症状（精神不振、后肢软弱、步态不稳、甚至瘫痪、昏迷）。给银杏浸膏组的丙二醛含量由2.4μ/mg降到1.6μ/mg蛋白质；脑组织水分由80.3%降至79.3%；Na⁺含量由6.68mg/g减至5.37mg/g；脑水肿症状显著减轻，不出现后肢瘫痪〔112〕。④保护视网膜。视网膜光感受器细胞的浆膜富含多不饱和脂肪酸，故对氧自由基引起的脂质过氧化非常敏感，可根据视网膜电图（electrorectinogram）b波的波幅高低反映视网膜损坏程度。实验大鼠分为二组，一组服银杏叶提取物EGb-761每日100mg/kg，连服10日；另一组对照。10日后处死大鼠，分离视网膜，用生理盐水灌注，并记录膜电图。灌注液中加入Fe²⁺和维生素C（钠盐）。对照组视网膜55分钟后b波降低50%，而治疗组视网膜能维持较高的b波。证明银杏提取物有抗脂质过氧化、保护视网膜的作用〔113〕。糖尿病可并发视网膜病变，实验用四氧嘧啶造成大鼠糖尿病模型，持续1或2个月期间，视网膜对光刺激的膜电图反应的幅度降低。在糖尿病造型前以及致病期，每日口服银杏提取物EGb-761100mg/kg，可以部分防止视网膜功能丧失，其保护作用可能是由于清除氧自由基〔113〕。⑤保护心脏的作用。银或者叶提取物EGb-761灌注大鼠和豚鼠缺血后再灌注的离体心脏，或大鼠在位心脏缺血后再灌注，均可改善心电图心律紊乱，而对心血管基本功能没有显著影响〔43〕。其有效成分的一种黄酮类槲皮素，可显著缩短缺血再灌注引起心律失常的持续时间，尤其是显著减少心室颤动的发生率，提示有抗活性氧的作用〔114〕。大鼠经苯巴比妥处理提高肝微粒体酶活性后，再用蒽醌类抗癌抗生素阿霉素（adriamycin），可与肝微粒体P₄₅₀还原酶和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）反应，形成半醌基团（semiquinone），再与氧反应产生超氧自由基，损害脱氧核糖核酸（DNA），有抗癌作用，也有致突变、致癌和损害心肌的不良作用。尿酸对此过程无显著作用；而银杏叶提取物EGb-761则有显著阻止阿霉素生成氧自由基，并能捕捉已生成的氧自由基，防止上述不良反应〔108，116〕。⑥对肠缺血再灌注起保护作用。大鼠实验，阻断肠系膜动脉后重新灌注，可引起肠粘膜通透性增加，增加萤光素钠通透性和乙酰-ß-葡萄糖胺释放入肠腔内；并使粘膜中白细胞髓过氧化酶活性提高、丙二醛含量增多。静脉注射银杏叶提取物，有剂量依赖性减轻所有缺血再灌注效应，证明对肠粘膜的保护作用与减轻多形核白细胞浸润、防止脂质过氧化有关〔117〕。⑦保护皮肤胶原组织。实验用牛皮胶原蛋白（collagen）的酸性胶体溶液，加入黄嘌呤氧化酶和次黄嘌呤的氧自由基产生系统，可使胶原蛋白纤维状多肽链裂解。在胶原与氧自由基产生系统一起孵育之前，加银杏叶黄酮类或花色素甙（anthocyanins），可产生剂量依赖性保护胶原蛋白的作用〔107〕。

5．抗病毒、抗癌作用抑制致癌物发展过程是预防恶性肿瘤的重要途径。松木武〔119〕用银杏绿叶甲醇粗提物，再经正庚烷提取分离得到十七碳烯水杨酸，或再经氯仿提取分离得到白果黄素（bilobetin,为双黄酮化合物），这两种脂溶性成分，对Raji细胞感染EB病毒（Epstein-Barrvirus）的致癌启动因子，均有很强的抑制作用，特别是白果黄素更强，可在稀释57倍的浓度下呈75%的抑制效果，超过具有显著拮抗致癌启动因子的维生素A酸（视黄酸）的作用。

银杏叶中黄酮类芦丁（芸香甙）、槲皮素都有抑制苯并芘在小鼠离体皮肤中的代谢以及与细胞核内DNA形成致癌复合物的作用。芦丁和槲皮素也能抑制直接（不经体内代谢激活）的致癌物N-甲基-N-亚硝脲的致癌作用。槲皮素还能抑制12-O-四癸酰基佛波醇-ß-乙酯的促进肿瘤发生作用〔122〕。

欧洲专利（1993）报道〔120〕：预先给予银杏内酯类，尤其是银杏内酯B能增强抗癌药治疗晚期转移性肿瘤的疗效（无具体数据）；并能改善抗癌化疗引起的不良反应，可口服，亦可静脉给药。欧洲专利（1990）报道〔123〕：银杏叶中最显著的活性成分“bioparyl”对核糖核酸酶（RNAase）有调节作用，可以防止或逆转各组织的纤维变性。

6．肥大细胞增多症肥大细胞含有大量嗜碱性颗粒，在病理状态时可发生脱颗粒而释出多种炎症介质，如组胺、白三烯、血小板活化因子等，引起微血管扩张、通透性增加、血液浓缩、平滑肌尤其是胃肠道和支气管平滑肌收缩。Guinot等报道〔121〕一成人全身性肥大细胞增多症（mastocytosis），临床表现有面部和躯干部红斑，反复发作的面部潮红、结合膜充血、心悸、头晕、恶心、腹痛、腹泻、重度低血压等症状。应用血小板活化因子拮抗剂银杏内酯A、B、C混合物（BN52063）120mg口服，每日2次，连用3周，取得良好效果。

7．抗卡氏肺囊虫作用卡氏肺囊虫病可在免疫功能低下者感染，如艾滋病（获得性免疫缺陷综合征，AIDS）临床诊断确定时，平均有60%患者感染卡氏肺囊虫（Pneumocys-tiscarinii）,可发展成卡氏肺囊虫肺炎。银杏叶中含的白果内酯（bilobalide）为15碳4环倍半萜化合物，在玻器内和动物体内均有较强的杀灭卡氏肺囊虫滋养体的作用。Atzori等（1993）报道〔124〕：玻器内试验采用人胚成纤维细胞培养的卡氏肺囊虫滋养体，以显微镜下形态学变化为指标，结果表明白果内酯（50μg/ml，与卡氏肺囊虫病标准治疗药物甲氧苄氨嘧啶（TMP）9μg/ml加碘胺甲基异噁唑（SMZ）45μg/ml合用的效果相同。动物实验用免疫抑制剂预处理的大鼠，从气管内接种卡氏肺囊虫滋养体5×10⁶个。然后每日腹腔注射白果内酯10mg/kg，连续8日；与不给药对照组比较，原虫减少2个数量级（99%）。白果内酯无明显毒性。

中药青蒿素亦为倍半萜内酯类化合物，对疟原虫滋养体有杀灭作用。青蒿素结构与白果内酯相似，都对原虫滋养体有杀灭作用。白果内酯对疟原虫红内期滋养体是否有效尚未见文献报道，值得进一步研究。我国民间曾用银杏叶治疗“白带清稀”，白果内酯对阴道滴虫有无抗原虫作用亦值得研究。

8．药物代谢动力学大鼠口服¹⁴C标记的EGb-761，约有60%以上被吸收。服药后1.5小时血中药物浓度达高峰。在服后3小时，胃及小肠中可测得特异性放射强度最高值，表明胃与小肠是本品吸收部位。其药物代谢动力学具二室模型特征，消除半衰期为4.5小时。吸收相为一级动力学，吸收量与给药量正相关（恒比吸收）。服后3小时内药物主要分布在血浆，但48小时后血浆和红细胞内分布量相似。体内分布以腺体、神经元组织以及眼球等分布最多。口服72小时内，有38%从呼气中排出（¹⁴CO₂），22%从尿中排出，29%从粪中排出〔125〕。

健康志愿者口服银杏叶提取物kaveri(LI1370)(含银杏黄酮甙25%和萜类6%)50mg、100mg、300mg,主要在小肠中被吸收，2～3小时内血药浓度达峰值。摄入后24小时血药浓度降至基础水平〔73〕。

在人体实验中尚证实口服EGb-76180～120mg,生物利用度：银杏内酯A>98%，银杏内酯B>80%，银杏内酯C较低；白果内酯为70%。血药消除半衰期：银杏内酯A为4小时，银杏内酯B为6小时，白果内酯为3小时。从尿中以原形排出的：银杏内酯A和B分别为70%和50%，而白果内酯仅30%〔51，73〕。银杏黄酮甙类口服利用度>60%,消除半衰期2～4小时〔73〕。

爱华网本文地址 » http://www.aihuau.com/a/25101010/25647.html