斐林试剂与班氏试剂比较 班氏试剂检验葡萄糖

斐林试剂与班氏试剂比较

高中生物教材中的有关实验中用到了斐林试剂和班氏试剂，二者都可用于鉴定可溶性还原糖，但两种试剂的配制、反应原理及使用方法均有所不同，教材只介绍了斐林试剂的配制和使用方法，对班氏试剂的配制和反应原理没做任何解释。班氏试剂是如何配制的？与斐林试剂的配制、反应原理有何不同？学生对此有较多疑问，现解释如下。

1.斐林试剂的配制、使用方法及反应原理

斐林试剂由甲液（0.1g/mlNaOH）和乙液（0.05g/mlCuSO₄）组成，用于鉴定可溶性还原糖，使用时将等量的甲、乙液混合均匀，取适量加入待测液，此时溶液呈蓝色。沸水浴加热2min左右，即可观察到有砖红色沉淀生成，说明待测液中有可溶性还原糖。

甲、乙液混合时，生成了Cu(OH)₂，而新制的Cu(OH)₂在还原性糖的作用下，被还原为Cu₂O砖红色沉淀。实验过程中，必须先把甲、乙液等量混合均匀，使Cu(OH)₂充分生成。如果先后或者分别把NaOH和CuSO₄溶液加入到含有还原性糖的组织提取液中，其中的有机酸会与NaOH迅速反应，使反应物中没有Cu(OH)₂或者Cu(OH)₂量不足，从而使还原性糖与Cu(OH)₂的反应不能进行或现象不明显，影响还原性糖的鉴定。

2.班氏试剂的配制、使用方法及反应原理

班氏试剂一般用于尿糖的测定，有时也用于其他实验中可溶性还原糖的鉴定。配制方法：取柠檬酸钠86.5g和无水碳酸钠50g放入1000ml锥形瓶中，加水350ml，加热至溶解。另取100ml锥形瓶加入硫酸铜8.65g，加水约50ml，加热溶解。待二者冷却至室温，将硫酸铜溶液慢慢倒入前液，随时搅匀，并补足水量至500ml。

使用时，取1ml班氏试剂加入试管，加入糖尿病患者的尿液0.1ml，混匀后沸水浴加热，可观察到溶液开始为蓝色，后来出现黄绿色、土黄色或砖红色沉淀，分别反映出患者尿液中糖含量的多少，结果见下表。

班氏试剂在配制过程中，当把硫酸铜溶液倒入由柠檬酸钠和无水碳酸钠配制的溶液中时，硫酸铜与碳酸钠和柠檬酸钠相遇，能产生出一种可溶性的又能离解出Cu²⁺的可溶性络盐，即柠檬酸钠此时能防止氢氧化铜沉淀的形成，做了一种亲水性掩蔽络合物形成剂。当利用班氏试剂测定还原性糖时，还原性糖在这种碱性溶液中能将Cu²⁺还原为Cu⁺，Cu⁺再与OH^－合成黄色的CuOH，加热后，CuOH即变成砖红色的氧化亚铜（Cu₂O）沉淀。

综上所述，斐林试剂与班氏试剂在配制和使用上均有所不同，不能混为一谈。另外，斐林试剂不稳定，必须现配现用，而班氏试剂配制好以后可较长时间保存。

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