爱华网本实验室现对外开放，可代做细胞培养技术服务，只限动物或临床类标本。以下是本实验室部分相关收费标准：细胞培养一天100元，转染1次1种细胞一次质粒600元（细胞质粒自己提供），transwell1000元一张，CCK-8每孔50，分PBMC 100元。如有不懂的，请来电咨询，13661449330，宋老师。
细胞培养的具体步骤和要求以及注意事项：
一、 复苏
1. 把冻存管从液氮中取出来，立即投入37℃水浴锅中，轻微摇动。液体都融化后（大概1-1.5分钟），拿出来喷点酒精放到超净工作台里。
2. 把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中（用培养基把冻存管洗一遍，把粘在壁上的细胞都洗下来），1000转离心5分钟。
3. 把上清液倒掉，加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动，使培养皿中的细胞均匀分布。
4. 标好细胞种类和日期、培养人名字等，放到CO2培养箱中培养，细胞贴壁后换培养基。
5. 3天换一次培养基。
二、 传代
1. 培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。
2. 把原有培养基吸掉。
3. 加适当的胰蛋白酶（能覆盖细胞就行），消化1-2分钟。
4. 细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。
5. 用移液枪吹打细胞，把细胞都悬浮起来。
6. 把细胞吸到15ml的离心管中，1000转离心5分钟。
7. 倒掉上清液，加1-2ml培养基，把细胞都吹起来。
8. 根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般，癌细胞分5个，正常细胞传3个。继续培养。
三、 冻存
把细胞消化下来并离心（同上）。用配好的冻存液把细胞悬浮起来，分装到灭菌的冻存管中，静止几分钟，写明细胞种类，冻存日期。4℃ 30min，-20℃ 30min，-80℃过夜，然后放到液氮灌中保存。
冻存液的配制： 70%的完全培养基+20�S+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加，边滴边摇。
要注意的就是无菌操作！
注：本实验室还对外开放细胞培养培训技术：
细胞培养平台（含流式分选）：全套细胞（复苏，冻存， 传代，计数）的规范培训，原代细胞的培养， 肿瘤干细胞的富集培养，肿瘤干细胞的流式分选，基因转染，功能获得与缺失等。
以下是肿瘤干细胞培养图：
