实验室常用试剂的配制Hanks液/PBS 0.1mpbs缓冲液的配制

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1.无Ca2+ 、Mg2+Hanks液

NaCl 4.5g

KCl 0.2g

NaHCO3 0.175g

Na2HPO4·12H2O 0.076g

KH2PO4 0.03g

葡萄糖 0.5g

0.4%酚红 2.5ml

将上述成分依次溶解或加入到双蒸水中,最后补加双蒸水至500ml,以5.6%NaHCO3调整 pH 值至7.4,4℃冰箱保存备用。

2.甲基红试剂

(1)成份

甲基红 0.1g

蒸馏水 200ml

95%乙醇 300ml

(2)用途:测定甲基红反应。

3.Hanks液(原液)

原液甲: NaCl 160g

KCl 8g

MgSO4·7H2O 2g

MgCl2·6H2O 2g

上述试剂加入800ml双蒸水。溶解。

CaCl2 2.8g溶于100ml双蒸水

上述二液混合,加双蒸水至1000ml,再加2ml氯仿防腐,4℃保存。

原液乙: Na2NPO4·12H2O 3.04g

KH2PO4 1.2g

葡萄糖 20g

加入800ml双蒸水,溶解。

0.4%酚红溶液 100ml

上述二液混合,加双蒸水至1000ml,再加2ml氯仿防腐,4℃保存。

使用时甲,乙原液按下列比例配成 Hanks 液

使用液:原液甲1份、原液乙1份、双蒸水18份滤过,8磅20min灭菌,放4℃冰箱保存,使用前用NaHCO3调整pH值。

4.0.4%酚红溶液

称取0.4g酚红置研钵中研碎,逐渐加入0.1mol/LNaOH并不断研磨,直到所有的颗粒几乎完全解,加入0.1mol/LNaOH 10ml,然后倒入容量瓶中,并加蒸馏水至100ml,棕色瓶保存备用。

5.pH7.2 Tris-NH4CI溶液(红细胞崩解液)

Tris (三羟甲基氨基甲烷) 1.03g

NH4Cl(氯化氨) 3.735g

加双蒸水至500ml,用浓HCl调pH=7.2,10磅15min灭菌后放4℃保存。

6.0.05moI/L pH8.6 巴比妥缓冲液

巴比妥 1.84g

加蒸馏水 200ml 加热溶解

巴比妥纳 10.3g

叠氮纳 0.2g

加蒸馏水溶解 , 并补加到 1000ml 。

7.磷酸盐缓冲液 (PB)

A 液:为 0.2mol/L 磷酸二氢钠水溶液,NaH2PO4 · H2O 27.6g, 溶于蒸馏水中,最后补加蒸馏水至 1000ml 。

B 液:为 0.2mol/L 磷酸氢二钠水溶液,Na2HPO4.7H2O 3.6g(或Na2HPO4·12H2O 71.6g,或Na2HPO4 · 2H2O 35.6g ), 加蒸馏水溶解,最后加水至 1000ml。若再加蒸馏水至200ml则成为0.1mol/LPB。

8.0.1mol/LPH8.4 硼酸缓冲液(BBS)

硼酸钠(Na2B4O7.10H2O) 0.46g

硼酸(H2BO3) 0.51g

加蒸馏水至100ml 溶解。

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