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微生物的实验室培养
学习目标
1. 了解有关培养基的基础知识
2. 掌握无菌操作技术
3. 了解纯化大肠杆菌的基础知识
学习重点、难点
了解有关培养基的基础知识；掌握无菌操作技术
自主学习
一、基础知识
1.培养基
（1）培养基的种类包括 培养基和 培养基等。
（2）培养基的化学成分一般都含有 、 、 、 四
类营养成分，
（3）在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对 、
以及 等的要求。例如：培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加 ；培养霉菌时
需要将培养基的PH调至 ；培养细菌时需要将培养基的PH调至 ；培养厌
氧微生物时需要提供无氧的条件
【思考】为什么各种营养基的具体配方不同，但一般都有水、无机盐、碳源和氮源？
2.无菌技术
（1）获得纯净培养物的关键是 。避免杂菌污染的方法主要
包括以下四个内容：①
② ③ ④
（2）消毒是指 灭菌是指
【思考】消毒与灭菌的相同点与区别分别是什么？
（3）实验室常用的消毒方法是 ，此外，人们也常使用化学药剂进行消毒，如
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用 、 等。常用的灭菌方法有 、 、 ，此外，实验室里还用 或 进行消毒。
二、实验操作
1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤： → → → →倒平板
（2）倒平板的过程
【思考】
⑴培养基灭菌后，需要冷却到50左右，才能用来倒平板。你用什么方法来估计培养基的
温度？
⑵为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
⑶平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
⑷在倒平板的过程中，如果不小心瘵培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？
2.纯化大肠杆菌
（1）微生物接种的方法中最常用的是 和 。
平板划线法是指 。
稀释涂布平板法是指 。
（2）平板划线的操作步骤如下：
①
②
③
④
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⑤
⑥
⑦
【思考】
①为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？
②在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？
③在作第二次以及其后的划线操作是赤什么总是从上一次划线的末端开始划线？
（3）系列稀释操作步骤：
①
②
③
（4）涂布平板操作步骤：
①
②
③
④
4. 菌种的保存
为了保持菌种的纯净，需对菌种进行保藏。对于频繁使用的菌种，我们可以采用 法；对于需要长期保存的菌种，可以采用 法。将菌种放在低温环境中保藏的目的
是 ，但时间长了菌种还是要老化的，因此对临时保存的菌种 个月后需重新接种
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