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食品和饲料中转基因植物FMV35S启动子环介导等温扩增检测方法的建立
作者：邝筱珊 胡松楠 游淑珠等
来源：《安徽农业科学》2014年第16期
摘要 [目的]建立FMV35S基因启动子环介导等温扩增的检测方法。[方法]建立一种检测食品和饲料中FMV35S转基因成分的环介导恒温扩增（LAMP）检测方法，并利用实时浊度法对该LAMP检测方法进行灵敏度、特异性和稳定性评价。[结果]该方法的检测限为0.5%，特异性和稳定性良好。采用LAMP法与荧光PCR方法进行了实际样品对比检测，结果一致可靠。
[结论]可采用LAMP法对食品和饲料中FMV35S转基因成分进行检测。
关键词 食品；饲料；FMV35S基因；环介导恒温扩增；检测
中图分类号 S188 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2014）16-04999-03
截止到2012年，转基因作物的种植面积已经连续增长17年，达到了420 000 000
hm2[1]。新型转基因生物不断涌现的同时，有关转基因作物在食品安全性、环境保护和伦理方面的争论一直愈演愈烈。为了满足消费者的知情权和国际贸易的要求，越来越多的国家和地区要求对转基因食品进行标示。不同的国家和地区也相应的发布了检测方法和判定标准。我国也于2002年7月开始实施《转基因食品卫生管理条例》，对转基因食品产品进行标识管理。 荧光PCR法是经典的转基因检测方法，同时也是目前采用较多的一种检测方法。近年来，越来越多的人将目光投向了非PCR检测方法的研究，比如基于蛋白质的ELISA、免疫层析试纸条方法；还有基于核酸的荧光交叉相关光谱法[2]、基于生物条形码的电化学发光法
[3]、基因芯片法[4]等。
环介导等温扩增（LAMP）是一种新的、非PCR的核酸检测方法[5]，最少可利用4条引物，在Bst DNA poLymerase作用下检测目的基因片段。LAMP反应有以下几个优点：不需要复杂的仪器装置，仅靠水浴锅或等温孵育装置即可达到反应要求；扩增产物肉眼可辨，不需要检测装置即可快速准确的判断；、LAMP检测反应时间短，1 h内可出具检测结果。基于以上优点，近些年LAMP已经广泛应用于病毒、食源性微生物、转基因和肉类鉴定方面[6-10]。 玄参花叶病毒35S启动子（Figwort Mosaic Virus promoter）FMV35S基因是植物遗传操作常用标记基因，很多转基因植物（如MON89034，RT73等）都含有FMV35S基因，是检测转基因生物的重要指标。笔者建立一种检测食品和饲料中FMV35S转基因成分的LAMP方法，为转基因的检测扩增提供理论依据。
1 材料与方法
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