金霉素眼膏成分 金霉素 金霉素-成分药理,金霉素-药品使用

金霉素(Aureomycin),为四环素类抗生素,许多立克次体属、支原体属、衣原体属、非典型分枝杆菌属、螺旋体对本品敏感。肠球菌属对其耐药。用于敏感金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌等敏感革兰阴性菌所致浅表眼部感染的治疗;也可用于沙眼衣原体所致沙眼的治疗。有四环素类药物过敏史者禁用。金霉素是一种高效广谱抗生素,对多种病原菌有较强的抑制作用,常用于动物各种传染性疾病的治疗,。但其在动物肉、奶、蛋等食品中的残留严重威胁人体健康,能引起再生障碍性贫血和粒状白细胞缺乏症等疾病。

金霉素_金霉素 -成分药理

药品成分

每1g眼膏含盐酸金霉素约0.005g,辅料为:液状石蜡、白色凡士林。

金霉素眼膏成分 金霉素 金霉素-成分药理,金霉素-药品使用

药理毒理

多年来由于四环素类的广泛应用,临床常见病原菌对金霉素耐药现象严重,葡萄球菌等革兰阳性菌及多数肠杆菌科细菌耐药。本品与四
蛋白质环素类不同品种之间存在交叉耐药。本品作用机制为药物能特异性与细菌核糖体30S亚基的A位置结合,抑制肽链的增长和影响细菌蛋白质的合成。

药代动力

学本品为局部用药,很少吸收。

制剂规格

眼膏:0.5%。

金霉素_金霉素 -药品使用

适应症

金霉素用于敏感金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、肺炎链球菌等革兰阳性菌及流感嗜血杆菌等敏感革兰阴性菌所致浅表眼部感染的治疗;也可用于沙眼衣原体所致沙眼
金霉素的治疗。用于敏感金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、肺炎链球菌等革兰阳性菌及流感嗜血杆菌等敏感革兰阴性菌所致浅表眼部感染的治疗;也可用于沙眼衣原体所致沙眼的治疗。

用法和用量

涂入眼睑内,每日1~2次,最后一次宜在睡前使用。

金霉素_金霉素 -测量鉴定

药品鉴别

在含量测定项下记录的色谱图中,供试品主峰的保留时间应与盐酸金霉素对照品主峰的保留时间一致。

药品检查

应符合眼膏剂项下有关的各项规定(附录Ⅰ G)。

含量测定

取本品约2g,精密称定,置分液漏斗中,加乙醚25ml,振摇使基质溶解,用0.1mol/L盐酸溶液提取3 次,每次10ml,
乙醇合并提取液,置50ml 量瓶中,加水稀释至刻度,作为供试品溶液;另取盐酸金霉素对照品约20mg,精密称定,置100ml量瓶中,加0.01mol/L盐酸溶液并稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。照盐酸金霉素项下的方法测定。

金霉素_金霉素 -禁忌注意

不良反应


水肿少见,应用本品后可感到视力模糊。应用时耐药菌株可过度生长。
1、轻微刺激感。
2、偶见过敏反应,出现充血,眼痒,水肿等症状。

药品禁忌

有四环素类药物过敏史者禁用。

注意事项

急性或慢性沙眼的疗程应为1~2月或更长,眼膏可作为夜间治疗用药,以保持感染部位与药物接触较长时间。
盐酸金霉素眼膏不但只对眼病有效,人体小面积的细菌感染基本都可以治愈,如鼻腔溃疡、皮肤发炎、脓疮等。

金霉素_金霉素 -眼膏的妙用


牛胰岛素1、红眼睛是指眼白外面的一层薄膜急性发炎,称为结膜炎。主要由传染引起,表现为眼屎多,有刺痛、怕光、异物感。可先用温开水清除分泌物,然后涂金霉素眼膏,闭眼休息片刻,一日3次,晚上临睡时再涂1次。
2、角膜炎角膜是指黑眼珠前面的一层透明薄膜,一旦发炎,应立即涂金霉素眼膏治疗。
3、偷针眼医学上称为麦粒肿,切勿用手挤压,以免造成严重并发症。在它尚未形成脓肿前,每日热敷3次,每次20分钟,然后涂金霉素眼膏,每日2~3次。
4、烂口角当口角出现糜烂时,一方面服用核黄素(维生素b2)治疗,另一方面用棉签蘸温开水洗涤伤口,揩干,再抹上金霉素眼膏,可较快愈合。
5、疖肿鼻粘膜有小结节胀痛时,可用药棉蘸取金霉素眼膏涂于鼻腔痛处,并轻压鼻子,促使它吸收。
6、干裂冬季有些人手足发生干裂现象,应先用热水洗净揩干,再涂上金霉素眼膏,用胶布固定,可较快愈合。

金霉素_金霉素 -杂质含量


眼结膜
金霉素
金霉素目的用气相色谱法测定盐酸金霉素中乙醇的残留量。方法采用80~90目的HayeSEPQ固定相,异丙醇为内标物,用内标法测定盐酸金霉素中残留乙醇的含量。结果该方法在乙醇浓度范围0.1~1.0mg/ml内呈良好的线性关系,响应曲线相关系数为0.9979,平均回收率为96.8%,变异系数为1.86%。结论本法简便,灵敏度高,可有效地用于盐酸金霉素的质量控制。
盐酸金霉素在精制过程中需加入溶媒乙醇,残留乙醇的浓度若过高将对人体造成不同程度的损害,为了控制乙醇在盐酸金霉素中的含量,保证产品的安全可靠性,我们将盐酸金霉素中残留乙醇的含量≤0.5%作为内控标准。
仪器与试药
仪器日本岛津GC-14B气相色谱仪,江申色谱工作站;1ml,10μl进样器;
试药盐酸金霉素(福州抗生素集团有限公司,批号为20010530);乙醇(AR)、异丙醇(AR)、去离子水;双蒸水。
色谱条件与系统适用性
色谱柱2m×3mm的固定相为HayeSEPQ80~90目的不锈钢柱,柱温150℃;检测器:氢焰检测器;气化温度:180℃;载气:N2;压力:100kpa;进样量:1ul;乙醇、异丙醇的分离度R≥1.5;方法:内标法。
计算公式f=(Ai×dr)/(Ar×di);Ms%=(f×As×di)/(Ai×W);其中dr、di分别为乙醇、异丙醇的密度;Ar、Ai、As分别为标准乙醇、异丙醇、残留乙醇的峰面积,dr=0.7893,di=0.7855。
标准溶液与供试品溶液的制备
标准溶液的制备用1ml的吸量管分别准确吸取1ml乙醇和异丙醇放入盛有少量去离子水的1000ml容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀。
供试品溶液的制备
用1ml吸量管准确取异丙醇1ml放入盛有少量蒸馏水的1000ml容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀。
在安瓿中,准确称取约50mg盐酸金霉素样品,用1ml注射器加入(3.2.1)所配制溶液1ml,快速将安瓿封口,置于水浴中,加热煮沸数分钟至样品完全溶解,取出并冷却。
方法学考察
最佳固定相选择使用15%PEG-2CM白色填料(60~80目)进行测试条件摸索,柱温60℃,样品没有响应信号,柱温升高虽有响应信号,但灵敏度太低,达不到色谱要求,无法测定微量溶媒。使用HayeSEPQ80~90目效果较好。。
定量限试验在(2.1)色谱条件下,基线稳定后,计算基线噪音水平;配制系列浓度梯度溶液进样,以响应峰高约10倍基线噪音的试液浓度为该方法定量限。在定量限浓度处,连续进样6次,计算响应峰面积的相对标准偏差。
表1响应峰面积的相对标准偏差
表2乙醇响应峰面积与浓度之间相关系数及线性范围
注:曲线方程为:Y=122271X-565.2
线性关系分别配制0.1mg/ml,0.15mg/ml,0.20mg/ml,0.25mg/ml,0.30mg/ml,0.40mg/ml的标准乙醇溶液,在(2.1)色谱条件下,各进样1.0μl记录谱图,以浓度C横坐标,以峰面积A为纵坐标,计算乙醇响应峰面积与浓度之间相关系数及线性范围。
精密度试验分别吸取(3.1)制备液1.0μl,分别进样6次,计算乙醇/异丙醇的RSD。
回收率试验分别准确吸取1μl,2μl,3μl,4μl,5μl的AR乙醇溶液,分别加入到已知浓度盐酸金霉素中测定其回收率。
结论
经过试验,使用HayeSEPQ80~90目测定微量溶媒灵敏度较高。本法操作简便,分析快速准确,重现性好,回收率高。

金霉素_金霉素 -化学检验


血浆蛋白
金霉素血清
金霉素脂肪组织
金霉素念珠菌金霉素是一种高效广谱抗生素,对多种病原菌有较强的抑制作用,常用于动物各种传染性疾病的治疗。但其在动物肉、奶、蛋等食品中的残留严重威胁人体健康,能引起再生障碍性贫血和粒状白细胞缺乏症等疾病,低浓度的药物残留还会诱发致病菌的耐药性。欧盟、美国等许多国家已明确禁止CAP用于生产动物源性食品,并制定了严格的限量标准。加入WTO后,农、兽药残留日益成为各发达国家限制中国农副产品出口的技术壁垒。2002年1月30日,欧盟委员会以从中国进口的虾仁中检出金霉素为由,发布2002/69/EC决议,禁止中国动物源性食品进口,直接造成中国水产品出口6亿多美元的经济损失。
金霉素等半抗原(分子量<1000Da)的检测方法,通常采用酶联免疫吸附反应(ELISA)及高效液相色谱(HPLC)及气-质联用(GC-MS)等方法。然而,这些方法需要较长的实验时间及相应昂贵的实验设备,主要被限制在实验室中使用。随着人们对食品安全的日益重视和进出口贸易的高速增长,迫切需要一种能快速、稳定地检测农、兽药残留的方法。胶体金免疫层析试条因其使用方便已被广泛用于小分子物质的诊断检测,目前已经开发出用于链霉素、磺胺嘧啶等农、兽药残留检测的试纸条。本实验开发了一种快速检测金霉素残留的免疫层析试纸条,具有灵敏度高,操作快捷,不需要附加设备等优点,适用于加工企业对原辅材料验收,人员用药,成品分析以及养殖场对投入品的检测等工作。
1材料与方法
1.1材料氯金酸(HAuCl4・4H2O)、金霉素标准品、牛血清白蛋白(BSA)和聚乙二醇20000购于SIGMA公司;抗金霉素单克隆抗体(MAb),购于Biodesign公司(免疫原为KLH与金霉素的偶联物,鼠源性);水溶性碳二亚胺(EDC)、金霉素琥珀酸钠盐,购于Fluka公司;羊抗鼠IgG购于北京鼎国生物技术有限公司;金霉素ELISA检测试剂盒购于EURO-DIOGNOSTICA公司;Bradford蛋白定量试剂盒购于Bio-Rad公司;BioJetXYZ3000型点膜仪购于美国BioDot公司;硝酸纤维素膜(NC)、胶体金结合垫、样品垫、吸水垫购于Millipore公司。
1.2胶体金的制备及抗金霉素Mab的金标记胶体金颗粒的大小平均为30nm,参照文献制备胶体金颗粒,在100ml去离子水中加入1%柠檬酸三钠1ml,煮佛后迅速加入1%氯金酸1ml,继续煮佛10min,冷却后,4℃下保存备用。
取已制备好的胶体金溶液100ml,用0.1mol/L碳酸钾溶液调pH到8.0。边搅拌边加入抗金霉素MAb1.5mg,搅拌20min,再逐滴加入2ml25mg/ml聚乙二醇20000(PEG20000),搅拌15min。20000r/min离心15min,弃上清液,加入10mlpH7.4PBS缓冲液(含0.4mg/mlPEG)清洗2次。将沉淀用5ml含2%BSA的PBS缓冲液(Ph7.4)溶解,用0.22μm无菌过滤器过滤后,4℃保存备用。
1.3样品制备金霉素标准样品配制以甲醇配成100μg/ml标准贮液,后以超纯水稀释成各浓度梯度。
肉类样品预处理取10g均质过的试样,加入10mlPBS,37℃混合保温90min后,3000rmin离心20min,收集上清液备用。
牛奶样品预处理取5ml新鲜牛奶,放入离心管中,10℃3500r/m离心10min,吸除上层的脂肪层,取去脂牛奶用PBS适当稀释后备用。
将上述试样处理液与各种浓度的金霉素标准品按不同体积比混合成所需浓度的试样。
部分实际待测试样的处理方法参考荷兰EURO-DIAGNOSTICA金霉素检测试剂盒产品试样处理方法。
1.4金霉素全抗原的合成包被抗原为金霉素与BSA的偶联物(CAP-BSA),其合成方法为活性酯法及叠氮法,参见文献,其中活性酯法为:先将20mg氯毒素琥珀酸盐、15mgEDC及30mgBSA混合溶于1mlTris缓冲液中,0~4℃下避光搅拌1h,再加入5mgEDC,在0℃下搅拌反应12h,静置过夜后,后用Tris缓冲液透析3d。
将合成的CAP-BSA全抗原稀释成100μg/ml(蛋白浓度),后做200~300nm波长的紫外扫描,参照杨利国介绍的计算方法测算偶联比,即CAP与载体蛋白BSA的摩尔比。其中BSA浓度以BRADFORD蛋白定量试测定。
用EURO-DIOGNOSTICA公司的ILISA试剂盒检测金霉素浓度,操作方法参见产品说明书。在450nm波长处测A值,计算抑制率:
抑制率=B/B0×100%
B0为不含待测试样中金霉素的吸光值,B为含待测试样中金霉素吸光值。
1.5试纸条组装用点膜机把适当浓度的CAP-BSA及羊抗鼠IgG喷在NC膜上,分别作为检测线(T)和控制线(C),在37℃烘箱干燥8h。以同样方法,将制备好的金标记CAP单克隆抗体包被在胶体金结合垫上。
试纸条组成为一个PVC背板,在其上按顺序粘上样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫。用带MARK胶带绕背板覆盖在样品垫、胶体金结合垫及吸水垫上。用切割机将贴好的板切割成3mm宽的条,放入带干燥剂的铝箔袋中密闭储存。
1.6检测方法将CAP检测试纸条带MARK线的一端插入装有待测试样的容器中,使试样溶液沿膜从下往上移动。5min以后,即可判读结果。
结果与讨论
2.1检测结果的判读试纸条的组成。当样品垫端放入检测试样时,由于毛细作用液体向前移动。到达T线时,试样中的金霉素与固定在T线上的CAP-BSA复合物竞争结合抗金霉素MAb-胶体金复合物,若试样中金霉素浓度小于1ng/ml,则胶体金结合垫中的抗金霉素MAb-胶体金复合物与T线上CAP-BSA及C线上羊抗鼠IgG大量结合,T线呈色与c线相近,结果为阴性;若试样中金霉素的浓度大于1ng/ml,则抗金霉素MAb-胶体金复合物基本上与检测试样中的金霉素结合,不能与T线上的CAP-BSA结合,因此T线将比c线浅很多或完全看不到线,而且试样中金霉素浓度越高T线显色越浅,结果为阳性。如检测正确进行的话,控制线总会显示红色线条。
2.2CAP-BSA人工抗原合成本试纸条检测线所用的包被抗原为CAP-BSA偶联物,由本实验室人工合成。偶联反应后所得产物经紫外光谱分析,参照文献所介绍的方法计算其偶联比率。多次实验所得抗原的偶联比率在1:10~40左右,部分数据见表1。由表1可以看出,BSA与CAP偶联后最大吸收峰都发生蓝移,可能是其分子结构发生变化及环境极性增大的原因。对金霉素与BSA的偶联是否成功,还采用竞争抑制ELISA检测来判断。按梯度稀CAP-BSA偶联物,后由CAP-BSA与CAP标准品竞争结合金霉素抗体。
金霉素标准品对不同浓度CAP-BSA的抑制率,随着CAP-BSA稀释倍数的升高(CAP-BSA含量减少)酶标金霉素标准品对其的抑制率升高。即CAP-BSA与酶标金霉素竞争结合金霉素抗体,表明抗原偶联是成功的。
本实验还对CAP抗原的合成方法采用了活性酯法与叠氮法,并比较其对T线的影响。由于叠氮法合成的叠氮化合物为淡黄色物质,干扰T线显色,因此不适用作为检测线的包被抗原。而活性酯法合成的偶联物CAP-BSA1~3,以相同的BSA浓度包被T线,控制线都能与金标记的CAP抗体反应出现明显的红色线条,适合做包被抗原。并发现其不同结合比对检测的灵敏度有一定影响,见试纸条的调试部分。
2.3试纸条的调试将不同半抗原结合比、不同浓度的CAP-BSA和不同A值的金霉素单克隆抗体-胶体金复合物分别包被在硝酸纤维素膜和胶体金结合垫上,反复调试,使最终的灵敏度达到所需的要求。其用量如下:金霉素单克隆抗体-胶体金复合物采用A值为40(喷量2μg/cm)的包被量,检测线CAP-BSA用量为0.1mg/ml(喷量0.75μl/cm),控制线羊抗鼠IgG用量为1mg/ml(喷量0.75μl/cm)。
调试结果表明采用不同pH值5、6、7、8、9、10的样品垫对试剂条的灵敏度没有产生明显影响。将硝酸纤维素膜用各种不同配比的溶液做封闭,发现试剂条的C、T线显色都变浅,但对灵敏度和特异性没有明显影响,所以最终制备试剂条时没有采用封闭的方案。经过比较发现,用同样的C、T线浓度、抗体-胶体金复合物A值和同样的包被量,采用12μm和5μm这两种不同比例的蔗糖和海藻糖,会对胶体金复合物从胶体金结合垫上的释放能力产生影响,在一定范围内,加入的蔗糖和海藻糖的比例越高,胶体金复合物释放得越快。
采用半抗原偶联率比较高的CAP-BSA做成的试剂条灵敏度更高,这可能同偶联比率高的CAP-BSA与金霉素单克隆抗体-胶体金复合物发生反应的能力更强有关。但过高的半抗原结合比并不符合C、T线颜色对比这种判断,反而使灵敏度下降。
本试纸条金霉素的最低检测水平(LDL)的判断标准是当检测线比控制线的颜色明显淡时,试样中金霉素的含量为1mg/ml。当试样中的CAP浓度大于5ng/ml时,检测线完全消失;当CAP浓度小于0.5ng/ml时,检测线与控制线在肉眼下没有明显区别。本试纸条的LDL可达到1ng/ml。检测限如再降低,容易出现假阴(阳)性的结果。由于其使用主要是在生产场所现场大批量初筛时定性检测,此灵敏度可以满足实际的筛选需要,如需可靠的定量结果还需在实验室里做ELISA、HPLC等进一步检测。
2.5检测的特异性将金霉素琥珀酸钠,甲砜霉素,磺胺二甲基嘧啶,四环素,青霉素,链霉素6种抗菌素溶于PBS(pH7.4,0.01mol/L),配成不同浓度,然后用试纸条检测。结果如图3所示,金霉素琥珀酸钠及金霉素在低浓度下即不出现红色T线。而后5者(类似物)即使在浓度大于100ng/ml时,也能见明显的T线,可见与不同抗菌素的交叉反应很低(因定性检测不能给出交叉率的确切数值)。由于T线包被抗原是以琥珀金霉素钠盐偶联BSA而成,因此金霉素琥珀酸钠与金霉素的这种交叉反应是在意料之中的。因此免疫层析试纸条可以通过观察试纸条上检测线的有无及颜色变化进行定性检测,对金霉素具有较高的特异性。
2.6稳定性试验用同一批次不同试纸条检测同一样品,及用不同批次试纸条测定同一样品,其质控线、测试线的显色时间及颜色深浅和最终结果判读基本相同。
利用该试纸条对含不同浓度金霉素残留的虾肉提取液试样进行检测并与ELISA的检测结果比较,总共检测50份(阳性30份,阴性20)。试纸条以1ng/ml为判断限值,没有出现假阳性及假阴性,检测结果与ELISA结果完全相符。如把检测限值再降低则易出现假阳性的结果,不能达到试纸条检测稳定性的要求。
免疫胶体金技术是20世纪70年代初期由Faulk和Taylor始创,最初用于免疫电镜技术。目前金标记技术常与膜载体配合,形成特定的免疫检测方式,如免疫渗滤试验和免疫层析试验等。免疫层析试纸条就是此技术用于体外快速诊断的一个重要发展方向,是在现代单克隆抗体技术、胶体金免疫层析技术和新材料技术基础上发展起来的新型检测技术。近年来该技术发展迅速,已经在临床诊断特别是床边检测(POCT)中得到了广泛应用,如传染病、早孕、癌症等的检测。目前已有些非临床检测的应用,如毒素、药残留、环境监测等。我们研制的金霉素胶体金免疫层析检测试纸条可用于饲料、水产类、牛奶等的检测,最低检测含量(LDL)达到1ng/ml。相对于目前使用ELISA方法检测金霉素样品至少需要24h,费用约为300元/个,试纸条只需10min就可出结果,费用低廉,而且不需要附加实验设备,能满足养殖场所和加工企业对原辅材料、人员用药及产品初筛等的检测需要。但由于实验样品来源有限,检测试纸条的各种参数,需在扩大样品范围与数量条件下做进一步的验证。

金霉素_金霉素 -生产企业

江西萍乡制药厂、福建省福抗药业股份有限公司、安徽省合肥第二制药厂、西安康华制药厂、新疆冠林制药有限公司、重庆科瑞制药有限公司、柳州市制药厂、深圳长白山制药厂实业有限公司、广州何济公制药有限公司、信阳地区江淮制药有限公司、河南省信阳制药厂、武汉第三制药厂、安徽省泗州孟仁寿眼药厂、古田县抗生素有限公司、芜湖三益制药有限公司、南通生物化学制药厂、昆山信成生物制药有限公司、南京白敬宇制药厂、上海申光制药厂、南通宝康制药有限公司、河北阔达生物制品股份有限公司、东北制药集团沈阳红旗制药厂、唐山市红星制药厂。

金霉素_金霉素 -误区解惑

前一阵子读过一篇护肤帖,其中有一条简单有效的祛痘方法――金霉素眼膏祛痘,但网友对它的评价褒贬不一。那金霉素眼膏祛痘究竟效果如何呢?
金霉素眼膏又名氯四环素,属四环类抗生素。许多立克次体属、支原体属、衣原体属、非典型分枝杆菌属、螺旋体对其敏感,而肠球菌属对其耐药。临床上适用于急性沙眼、结膜炎等。
为何能祛痘?为什么网上对它的评价会出现分歧呢?首先我们需要从源头来分析,长痘的原因是什么。
脸上长痘其实应该从两个方面来分析,首先从外部皮肤表层来看,有可能是皮肤沾染了灰尘污垢导致毛孔堵塞,抑或是细菌螨虫滋生,也可能是接触到了过敏原,这些都可以用外用药物来达到祛痘的效果。而从身体内部系统来看,有很多的痘痘是由于身体激素失调,内分泌失调导致的,这就需要用内在调理的方法来改善。可见,金霉素眼膏能祛痘的原因只是因为它有抗生素所具有的消炎效果,当然它的适应症并不是所有的痘痘了,仅对细菌感染皮肤滋生的痘痘有效。
除此之外,当细菌对金霉素眼膏产生了耐药性以后,那么眼膏对细菌所致的痘痘也就无效了。这就是为什么很多人会说第一次用很有效后来就没有效果了。

  

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